Иммунология и биохимия

Лабораторная диагностика уровня комплемента

Причины для анализа комплемента

Комплемент является неотъемлемой частью врожденного иммунитета, поэтому нарушения системы комплемента приводят к инфекциям, усиливают болезни и т.д. Тестирование функции комплемента позволяет оценить влияние определенных методов лечения. Поэтому важно проанализировать функциональную активность системы.
Три основные причины для изучения функции комплемента:

  • Дефицит комплемента связан с инфекциями и аутоиммунными заболеваниями. Дефицит классического пути часто связан с СКВ, гломерулонефритом и восприимчивостью к гнойным инфекциям. Дефицит альтернативного пути часто приводит к инфекциям Neisseria  и т. д. Отличным способом выявления дефицитов является изучение функции трех путей системы.
  • Активация системы комплемента является частью активных аутоиммунных заболеваний и, следовательно, отражает продолжающиеся заболевания. Например, при  СКВ важно следить за активностью заболевания, поскольку активация комплемента зависит от активности болезни и может обнаруживать обострения.
  • Новые методы лечения направлены на блокирование активности или увеличение активности комплемента,  поэтому мониторинг  функции комплемента важен при оценке эффективности терапии. 

Функциональное состояние   системы комплемента отражает гемолитический  тест 50% гемолиза - CH50 (классический путь и AH50 (альтернативный путь),

 Гемолитические тесты

Гемолитические тесты были разработаны уже в начале 20-го века,   они измеряют способность комплемента  пациента к  участию в гемолизе. Тест

CH50 оценивает способность   белков классического  пути и мембраноатакующего комплекса лизировать покрытые антителами  эритроциты барана. Разбавление сыворотки, которое лизирует 50% эритроцитов, называется СН50. Значение CH50 равно нулю   при врожденных дефицитах от C1 до C8, а при дефиците C9  его значение составляет половину нормы. Кроме того, дефицит факторов H или I приводят к низкому значению  СН50 из-за потребления C3. Тест не измеряет дефицит  белков альтернативных   путей активации.

Тест 50% гемолиза  очень полезен в качестве скринингового анализа для большинства заболеваний системы комплемента. Из-за нестабильности нескольких белков комплемента, анализ CH50 требует соответствующего сбора, обработки и хранения образцов. Образцы сыворотки следует анализировать в день сбора или хранить в замороженном виде. Общей причиной снижения значений CH50 является неправильная обработка крови. (Лабораторная диагностика комплемента).

Лабораторная диагностика  альтернативной   гемолитическая активность комплемента (AH50 ) используется реже, тест измеряет функцию альтернативного пути, которая отражает содержание   фактора B, фактора D и пропердина.

Лабораторная оценка лектинового пути  - определение манногозосвязывающего белка в сыворотке.

На рис.

Лабораторная диагностика  отдельных компонентов комплемента

Алгоритм тестирования дефицита комплементаКонцентрации сыворотки C1q, C1r, C1s, C4, C2, C3, C5, C6, C7, C8, C9 и фактора B измеряются с помощью радиальной иммунодиффузии, и их тестирование легко доступно. Снижение уровней C4 при нормальном уровне C3 отражает  активацию классического пути, снижение уровней фактора B при нормальном уровне C4 свидетельствует об активации альтернативного   пути, а снижение уровней C3 отражает активацию любого из путей.  

При наследственном ангионевротическом отеке (АНО) снижение уровня С4 и С2 во время атаки может или не может сопровождаться  снижением значения СН50 при нормальном уровне C3. Концентрация C1-INH  может быть определена с помощью иммуноферментного анализа.. Функциональный тест на C1-INH должен выполняться тем пациентам, у которых есть клиника АНО, но уровень белка C1-INH нормальный.

Низкие значения как C3, так и C4 предполагают активацию классического пути иммунными комплексами. С другой стороны, низкие уровни C3 и C4 предполагают и активацию альтернативного  пути. Это различие может быть полезно при дифференцировании нефрита, вызванного отложением иммунных комплексов и из-за NeF. Кроме того, уровни фактора B снижаются у лиц с NeF-индуцированным нефритом. Однако нормальные уровни компонентов комплемента не исключают активацию комплемента, которая является биологически важной, но недостаточно выраженной, чтобы снизить концентрацию компонентов в  сыворотке.

На рис. 1 отражен алгоритм тестирования дефицита комплемента, в таблице 1 идентификация недостаточности комплемента

Таблица 1 - Идентификация   недостаточности комплемента - первичное и вторичное тестирование

Первичное тестирование

 

Недостаточность

пути

 

Вторичное подтверждение

СН50

АН50

Маннозосвязывающий лектин (MBL)

Низкий или отсутствующий

Нормальный

Нормальный

Классическкий

Уровни комплемента или функциональное тестирование С1, С2,С4

С1-эстераза - если присутствует ангионевротический отек

Низкий или отсутствующий

Низкий или отсутствующий

Нормальный

Терминальный

Уровни комплемента или функциональное тестирование СЗ, С5, С6, С7, С8, С9

Уровни факторов H, I

Нормальный

Низкий или отсутствующий

Нормальный

Альтернативный

Уровень попердина или его функциональное состояние  

Уровни фактортов B,D

Нормальный

Нормальный

Низкий или отсутствующий

Лектиновый

Вероятность дефицита лектинового пути

 

 

Поиск по сайту