Диагностика туберкулеза. Методы диагностика активного туберкулеза у взрослых и детей. Дагностика латентного туберкулеза.

Диагностика туберкулеза (ТБ) — это оценка результатов обследования в отношении здоровья (например, активное заболевание ТБ или скрытая туберкулезная инфекция) с использованием метода или инструмента для измерения, идентификации или анализа состояния организма.
В диагностике in vitro используются образцы, взятые из организма человека. Большинство случаев диагностики ТБ являются in vitro. Диагностика in vivo проводится на организме — туберкулиновый тест кожи, используемый для диагностики латентной ТБ-инфекции, — это диагностика in vivo.

Диагностика TB используется для:

  • выявления скрытой туберкулезной инфекции
  • поиска  активного заболевания ТБ
  • получения  информации о резистентности к лекарственным средствам (какие препараты лучше всего подходят для лечения).

Туберкулезный диагностический словарь

Чувствительность: отражает   долю людей с заболеванием, которые правильно идентифицированы диагностическим инструментом как как больные.
Специфичность: отражает долю людей без заболевания, которые правильно идентифицированы диагностическим инструментом как не имеющие этого заболевания.
Ложно положительный: тест, результаты которого неправильно отражают наличие  заболевания (туберкулез, туберкулезная инфекция, лекарственная устойчивость), когда они не больны. Ложно  положительный результат теста показывает, что он имеет низкую специфичность.
Ложно отрицательный: тест, который неправильно показывает отсутствие заболевания (туберкулез, туберкулез, лекарственная устойчивость), когда оно имеется. Этот тест имеет низкую чувствительность.

Среда: вещества (твердые или жидкие), содержащие питательные вещества, которые позволяют выращивать бактерии ТБ в лабораторных условиях.

Культура: процесс выращивания бактерий туберкулеза на веществе, обеспечивающем питательными веществами  рост  бактерий туберкулеза. Испытание на чувствительность к лекарственным средствам (ИЧЛ): тест на выявление резистентности к лекарственным средствам, т. е. тест на то, чтобы увидеть, какие препараты будут лучше работать против определенного штамма туберкулеза

Золотой стандарт: лучший способ сделать что-то.

Диагностика активного туберкулеза

 ЦЕЛЬ  СКРИНИНГА?

Скрининг используется для выявления возможных случаев ТБ среди уязвимых групп населения с высоким риском заражения болезнью. Инструменты скрининга обычно не очень специфичны, но они чувствительны. Это означает, что ложно положительные результаты встречаются часто, но ложно отрицательные —  редко. Скрининг используется для исключения активных случаев туберкулеза или необходимости микробиологического тестирования.

Основными инструментами для скрининга туберкулеза являются   

  • симптоматический скрининг и
  • рентгенография грудной клетки.

 Симптоматический скрининг

Симптоматический скрининг может проводиться в группах с высоким риском заражения туберкулезом

Высокий риск ТБ: Симптомы туберкулеза:
  • Люди с тесным контактом с больным туберкулезом
  • Люди с ВИЧ
  • Рабочие, подвергающиеся воздействию кристаллической кремнеземной пыли
  • Кашель
  • Хемоптизм (кашель с кровью )
  • Лихорадка
  • Ночные поты
  • Потеря веса
Преимущества Недостатки
  • Помогает  всем людям обращаться за медицинской помощью
  • Позволяет запустить недорогой диагностический процесс
  • Неконкретный (нет окончательного ответа)
  • Проявляются, когда болезнь уже прогрессирует
  • Не полезен для внелегочного туберкулеза (ТБ вне легких)
  • Потенциально увеличивается количество ложных результатов

Рентгенография грудной клетки

Рентгенография грудной клетки — еще один вариант скрининга, ее можно использовать вместе с симпоматическим скринингом, чтобы лучше определить, дальнейшее диагностическое тестирование (рис.)

Преимущества

  • Быстрый
  • Высокая чувствительность
  • Недорогой
  • Широко используемый

Недостатки

  • Низкая специфичность
  • Требуется дополнительное тестирование
  • Нельзя использовать для внелегочного туберкулеза
  • Активный туберкулез не всегда выглядит одинаково (особенно у людей с ВИЧ)

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

Микробиологическое подтверждение — диагностика ТБ путем выявления наличия M. tuberculosis (MTB), бактерии, вызывающей туберкулез. Микробиологическое подтверждение является предпочтительным способом диагностики активного туберкулеза. Существует три типа микробиологических тестов на ТБ:

1) Поиск возбудителя

  • Микроскопия мазка мокроты

2) Амплификация возбудителя (умножение генетической информации    MTB)

  • Тест амплификации нуклеиновой кислоты (NAAT)
  •  Xpert MTB / RIF ULTRA
  • Линейные зондовые анализы

3) Посев

  • Твердая культура
  • Жидкая культура (MGIT, MODS, BacT / ALERT 3D)

1) Микроскопия мазка мокроты

  1. Процедура
  2. Собирают  мокроту
  3. Из небольшого объема мокроты  делают мазок на стекле
  4. Окрашивают   красителем для кислотоустойчивых бактерий (Циль-Нильсен)- Заливают мазок   метиленовым синим контраст
  5. Обесцвечивают  кислотно-спиртовым раствором
  6. Исследуют весь мазок  под 40-кратным увеличением
  7. Подтверждают наличие или отсутствие MTB
  • Результаты в тот же день
  • Низкотехнологичный
  • Недорогой
  • Широко доступный
  • Может использоваться для мониторинга лечения
Рис 2 — Микроскопия мазка мокроты при ТБ  Недостатки

  • Низкая чувствительность (50%) среди всех случаев
  •  Полезен толь для туберкулеза в легких
  • Неточен у детей, людей с ВИЧ
  • Не дает информации о восприимчивости к препарату
  • Многоступенчатая, сложная процедура
  • Не удается отличить МТБ от других родственных бактерий (не туберкулезные микобактерии)
Оптимизация микроскопии

ВОЗ рекомендует следующие стратегии для улучшения микроскопии:

  • Использовать флуоресцентное окрашивание
  • Использовать светодиодный (светодиодный) микроскоп
  • Можно использовать недорогой источник света с   питанием  от батареек.

Эти добавки облегчают обнаружение бактерий, повышая чувствительность на 10% и делая мазок на 25% быстрее по сравнению с обычной микроскопией.

Тем не менее, мазок менее чувствительны, чем Xpert MTB/RIF ULTRA  и не дает никакой информации о лекарственной устойчивости.

2) Тест амплификации нуклеиновой кислоты

Анализ амплификации нуклеиновой кислоты (NAAT) выполняет поиск генетической информации в тестируемом образце, поиск  присутствия MTB. NAAT может анализировать два разных вида генетической информации: ДНК и РНК. NAAT способен анализировать генетические мутации, которые   вызывают лекарственную устойчивость, позволяет определить, какое лечение будет наиболее эффективным. NAAT — это быстрый метод тестирования, потому что генетическая информация извлекается и усиливается, а не ждут роста бактерий.

 Система GENEXPERT

Система GeneXpert представляет собой тест на основе картриджа для определения MTB и резистентности к препарату рифампицин. Картридж называется «Xpert MTB / RIF ULTRA».Новый картридж Ultra более чувствителен, чем предыдущий Xpert MTB / RIF cartrdige, особенно у людей с ВИЧ, людей с внелегочным туберкулезом и у детей. Система анализирует выборку путем извлечения генетической информации MTB, умножения ее и чтения ее генетического кода

ВОЗ рекомендует GeneXpert в качестве первоначального теста для всех взрослых и детей, нуждающихся в оценке ТБ.

Новый картридж (2018 г) может обнаруживать устойчивость к большему количеству лекарств (изониазид, фторхинолоны и инъекционные препараты второй линии).

Преимущества GeneXpert

  • Один этап — автоматизированный
  • Быстрый (результат