Лабораторная диагностика уровня комплемента

Определение

Комплемент является неотъемлемой частью врожденного иммунитета, поэтому нарушения системы комплемента приводят к инфекциям, усиливают болезни и т.д. Тестирование функции комплемента позволяет оценить влияние определенных методов лечения. Поэтому важно проанализировать функциональную активность системы.

Три основные причины для изучения функции комплемента:

• Дефицит комплемента связан с инфекциями и аутоиммунными заболеваниями. Дефицит классического пути часто связан с СКВ, гломерулонефритом и восприимчивостью к гнойным инфекциям. Дефицит альтернативного пути часто приводит к инфекциям Neisseria  и т. д. Отличным способом выявления дефицитов является изучение функции трех путей системы.
• Активация системы комплемента является частью активных аутоиммунных заболеваний и, следовательно, отражает продолжающиеся заболевания. Например, при  СКВ важно следить за активностью заболевания, поскольку активация комплемента зависит от активности болезни и может обнаруживать обострения.
• Новые методы лечения направлены на блокирование активности или увеличение активности комплемента,  поэтому мониторинг  функции комплемента важен при оценке эффективности терапии.

Функциональное состояние системы комплемента отражает гемолитический тест 50% гемолиза — CH50 (классический путь и AH50 (альтернативный путь).

Гемолитические тесты

Гемолитические тесты были разработаны уже в начале 20-го века, они измеряют способность комплемента  пациента к  участию в гемолизе.

Тест CH₅₀ оценивает способность белков классического  пути и мембраноатакующего комплекса лизировать покрытые антителами  эритроциты барана. Разбавление сыворотки, которое лизирует 50% эритроцитов, называется СН_50. Значение CH₅₀ равно нулю   при врожденных дефицитах от C1 до C8, а при дефиците C9  его значение составляет половину нормы. Кроме того, дефицит факторов H или I приводят к низкому значению  СН₅₀ из-за потребления C3. Тест не измеряет дефицит  белков альтернативных   путей активации.

Тест 50% гемолиза  очень полезен в качестве скринингового анализа для большинства заболеваний системы комплемента. Из-за нестабильности нескольких белков комплемента, анализ CH₅₀ требует соответствующего сбора, обработки и хранения образцов. Образцы сыворотки следует анализировать в день сбора или хранить в замороженном виде. Общей причиной снижения значений CH₅₀ является неправильная обработка крови. (Лабораторная диагностика комплемента).

Лабораторная диагностика  альтернативной   гемолитическая активность комплемента (AH₅₀ ) используется реже, тест измеряет функцию альтернативного пути, которая отражает содержание   фактора B, фактора D и пропердина.

Лабораторная оценка лектинового пути  — определение манногозосвязывающего белка в сыворотке.

Лабораторная диагностика отдельных компонентов комплемента

Концентрации сыворотки C1q, C1r, C1s, C4, C2, C3, C5, C6, C7, C8, C9 и фактора B измеряются с помощью радиальной иммунодиффузии, и их тестирование легко доступно. Снижение уровней C4 при нормальном уровне C3 отражает  активацию классического пути, снижение уровней фактора B при нормальном уровне C4 свидетельствует об активации альтернативного   пути, а снижение уровней C3 отражает активацию любого из путей.

При наследственном ангионевротическом отеке (АНО) снижение уровня С4 и С2 во время атаки может или не может сопровождаться  снижением значения СН₅₀ при нормальном уровне C3. Концентрация C1-INH может быть определена с помощью иммуноферментного анализа.. Функциональный тест на C1-INH должен выполняться тем пациентам, у которых есть клиника АНО, но уровень белка C1-INH нормальный.

Низкие значения как C3, так и C4 предполагают активацию классического пути иммунными комплексами. С другой стороны, низкие уровни C3 и C4 предполагают и активацию альтернативного  пути. Это различие может быть полезно при дифференцировании нефрита, вызванного отложением иммунных комплексов и из-за NeF. Кроме того, уровни фактора B снижаются у лиц с NeF-индуцированным нефритом. Однако нормальные уровни компонентов комплемента не исключают активацию комплемента, которая является биологически важной, но недостаточно выраженной, чтобы снизить концентрацию компонентов в  сыворотке.